WWW.DIS.KONFLIB.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 
<< HOME
Научная библиотека
CONTACTS

Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 19 |

«Введение в биотехнологию Практикум Минск БГУ 2011 УДК 60(076)(075.8) ББК 30.16я73 Р88 Рекомендовано ученым советом биологического факультета 27 октября 2009 г., протокол № 3 Р е ц ...»

-- [ Страница 1 ] --

О. Б. Русь

А. М. Ходосовская

Введение в биотехнологию

Практикум

Минск

БГУ

2011

УДК 60(076)(075.8)

ББК 30.16я73

Р88

Рекомендовано ученым советом

биологического факультета

27 октября 2009 г., протокол № 3

Р е ц е н з е н т ы:

кафедра биотехнологии и биоэкологии Белорусского государственного технологического университета (зав. кафедрой кандидат химических наук, доцент В. Н. Леонтьев);

кандидат биологических наук, доцент кафедры микробиологии Белорусского государственного университета Р. А. Желдакова Русь, О. Б.

Р88 Введение в биотехнологию [Электронный ресурс] : практикум / О. Б. Русь, А. М. Ходосовская. – Минск : БГУ, 2011. – Режим доступа : http://www.elib.bsu.by, ограниченный.

ISBN 978-985-518-499-8.

В практикум включены лабораторные работы по курсу «Введение в биотехнологию», методические указания по их выполнению, вопросы для контроля самостоятельной работы студентов, программа курса и биотехнологический словарь. Задания могут быть использованы и при проведении учебной биотехнологической практики.

В биотехнологическом словаре приводится толкование различных терминов из биотехнологии и смежных с ней наук.

Предназначено для студентов 2-го курса специальности 1-31 01 01 «Биология» направления 1-31 01 01-03 «Биотехнология».

УДК 60(076)(075.8) ББК 30.16я © Русь О. Б., Ходосовская А. М, ISBN 978-985-518-499-8 © БГУ, Лабораторная работа Культивирование миКроорганизмов 1. глубинное Культивирование в жидКой питательной среде Для работы необходимо иметь: спиртовку, стерильные стеклянные пипетки на 5 или 10 мл, штатив со стерильными стеклянными пробирками на 10–15 мл, колбу с 10 мл жидкой полноценной питательной среды – питательного бульона (ПБ), чашку Петри с засеянной культурой бактерий Escherichia coli B, бактериологическую петлю, стакан для использованных пипеток, маркер по стеклу. На первой пробирке отмечают название засеваемой культуры – E. coli B (опыт), на второй пробирке – К (контроль стерильности работы).

На столе помещают спиртовку, пенал с пипетками кладут возле правой руки. Зажигают спиртовку, открывают пенал со стерильными стеклянными пипетками. Все манипуляции с пробирками проводят вблизи пламени спиртовки. Пипеткой набирают 5 мл ПБ и добавляют 2,5 мл в первую пробирку, а оставшийся объем среды вносят во вторую пробирку. Бактериологическую петлю стерилизуют прокаливанием в пламени спиртовки, остужают о незасеянную область агаризованной среды в чашке Петри или о внутреннюю стерильную поверхность крышки чашки Петри. Стерильным концом бактериологической петли снимают одну изолированную колонию бактерий и переносят в первую пробирку, тщательно ресуспендируют.

В контрольную пробирку засев бактерий не производят. Пробирки ставят в штатив и помещают в термостат (37 °С) для инкубирования в течение 18–24 ч.

Проводят учет результатов, оценивая наличие роста бактериальной культуры по помутнению питательной среды. Если рост бактерий наблюдается только в опытной пробирке, следовательно, эксперимент был выполнен правильно.

2. поверхностное Культивирование 2.1. Культивирование на поверхности агаризованной питательной среды в чашке петри Для работы необходимо иметь: спиртовку, пенал со стерильными стеклянными пипетками на 1 или 2 мл, стерильную чашку Петри с агаризованной полноценной питательной средой (ПА), пробирку с культурой E. coli B в ПБ, закрывающуюся емкость с этиловым спиртом, шпатель Дригальского, стакан для использованных пипеток, маркер по стеклу.

На дне чашки Петри подписывают название бактериальной культуры – E. coli B. Бактериальную культуру набирают пипеткой и 0,1 мл наносят на поверхность среды в чашке Петри. Шпатель стерилизуют методом обжигания в пламени спиртовки, остужают о внутреннюю поверхность крышки чашки Петри, после чего используют для засева бактериальной культуры на поверхность ПА. Чашку инкубируют в термостате (37 °С).

Через 24 ч выявляют наличие роста бактерий на поверхности агаризованной питательной среды.

2.2. Культивирование на поверхности скошенной агаризованной питательной среды Для работы необходимо иметь: спиртовку, чашку Петри с засеянной культурой бактерий E. coli B, флакон с расплавленным ПА, бактериологическую петлю, штатив со стерильными стеклянными пробирками, пенал со стерильными стеклянными пипетками на 5 или 10 мл, маркер по стеклу.

На пробирке подписывают название культуры бактерий, с помощью пипетки вносят 5 мл расплавленной и охлажденной до 50 °С питательной среды, после чего пробирки укладывают в наклонном положении на специальную подставку и дают среде застыть. Через 20–30 мин засевают бактериальную культуру простерилизованной и охлажденной бактериологической петлей на всю поверхность скошенной среды, делая частые зигзагообразные движения, начиная со дна пробирки. Пробирку ставят в штатив, который помещают в термостат (37 °С) на 24 ч, после чего анализируют рост бактерий по штриху.

выделение из почвы миКроорганизмов, продуцирующих гидролитичесКие Промышленное производство ферментных препаратов впервые началось в США в 1894 г. с получения грибной амилазы. Тогда этот фермент использовали в качестве лекарственного препарата при нарушениях пищеварения.

В настоящее время по объему производства ферменты занимают третье место после аминокислот и антибиотиков, причем основная их часть приходится на долю гидролитических ферментов. Среди гидролаз наибольшее применение получили пептидогидролазы (протеазы) и ферменты, расщепляющие гликозидные связи (амилазы, целлюлазы). Ферментные препараты находят широкое применение в различных областях промышленности (текстильной, целлюлозно-бумажной, химической – при производстве моющих средств, пищевой, фармацевтической) и в сельском хозяйстве (как кормовые добавки, ветеринарные препараты).



Для промышленного получения ферментов используются штаммы бактерий Bacillus, грибов Aspergillus, Trichoderma, Penicillium и др. Их клетки способны выделять ферменты в культуральную жидкость, что значительно облегчает процедуру очистки ферментных препаратов. Продуктивность этих организмов увеличена путем мутагенеза и селекции, а также путем оптимизации процессов культивирования.

Среди протеолитических ферментов, образуемых микроорганизмами, встречаются как эндопептидазы, так и экзопептидазы. Продуцентами протеаз, получаемых при промышленном производстве, являются преимущественно бактерии рода Bacillus и реже – стрептомицеты.

Кислые протеазы на основе высокоактивного продуцента Aspergillus oryzae применяют в производстве спирта и для получения белковых гидролизатов высокого качества в пищевой промышленности. В сочетании с амилазой эти ферменты также используют в хлебопекарной промышленности. Они улучшают качество и аромат хлеба, ускоряют созревание теста, увеличивают пористость и объем хлеба.

В молочной промышленности использование протеаз ускоряет созревание сыров вдвое и снижает их себестоимость на 10 %. В кулинарии обработка мяса пептидгидролазами Streptomyces griseus (протелином и проназой) перед его приготовлением значительно улучшает качество мясных блюд.

В текстильной промышленности процесс расшлихтовки (выравнивания поверхности) тканей ферментными препаратами класса протеаз грибного происхождения ускоряется в 7–10 раз; эти же препараты служат для удаления белка серицина при размотке коконов тутового шелкопряда при производстве натурального шелка.

В кожевенном и меховом производстве применяют препараты протеиназ (протелин и протофрадин), являющихся внеклеточными ферментами стрептомицетов. При этом время, требуемое для осуществления необходимых процессов, сокращается в несколько раз, сортность и качество шерсти и кож повышается.

Щелочные протеазы на основе высокоактивного продуцента Bacillus licheniformis вместе с целлюлазами являются компонентами стиральных порошков и моющих средств. Кроме того, протеолитические ферменты применяют при извлечении серебра из фотографических пленок и бумаги.

Важнейшей областью применения протеолитических ферментов является медицина. Нейтральные протеазы широко используются в лечении болезней желудочно-кишечного тракта, сердечно-сосудистой системы, в хирургии для обработки гнойных ран, ожоговых и обмороженных поверхностей. Протеазы способствуют размягчению омертвевшей ткани, облегчая тем самым дренаж ран и ускоряя их заживление.

На втором месте по объему промышленного использования, после протеаз, находятся амилолитические ферменты, которые катализируют гидролиз различных типов гликозидных связей в крахмале, декстране, гликогене и родственных полисахаридах. К ферментам, расщепляющим гликозидную связь внутри полисахарида (эндоамилазам), относятся -амилаза, пуллуланаза и циклодекстрин-глюкозилтрансфераза. Среди экзоамилаз выделяют -амилазу, глюкоамилазу и амилоглюкозидазу.

Из амилолитических ферментов чаще используют -амилазу (из Bacillus subtilis, B. amyloliquefaciens, B. licheniformis) и глюкоамилазу (продуцируется представителями рода Aspergillus).

-Амилаза – фермент, осуществляющий эндогидролиз -1,4гликозидных связей крахмала, гликогена и родственных им полисахаридов до мальтозы, декстринов и глюкозы. -Амилазы используются в процессе промышленного получения этанола как частичная замена дорогого солода в пивоварении, для улучшения качества муки в хлебопечении, а также в целлюлозно-бумажной промышленности. Кроме того, эти ферменты применяются в текстильной промышленности при изготовлении тканей и как добавки к моющим средствам.

Глюкоамилаза – экзофермент, атакующий крахмал с нередуцирующего конца полисахаридной цепочки, последовательно отщепляя глюкозные остатки с образованием преимущественно глюкозы. Препараты глюкоамилазы применяются для ферментативной обработки крахмалсодержащего сырья в спиртовой, крахмалопаточной, хлебопекарной и пивоваренной промышленности.

Целлюлолитические ферменты – ферменты класса гидролаз, катализирующие гидролиз 1,4-гликозидных связей в молекуле целлюлозы с образованием набора олигосахаридов различной степени полимеризации вплоть до мономера – глюкозы.

Среди целлюлолитических ферментов микроорганизмов выделяют экзоглюканазы (целлобиогидролазы, отщепляющие от нередуцирующего конца целлюлозной цепи как остатки целлобиозы, целлотриозы, глюкозы, так и более крупные фрагменты), эндоглюканазы (гидролизующие -1,4-гликозидные связи между остатками глюкозы в середине цепи), -глюкозидазы (катализирующие превращение целлобиозы и целлотриозы в глюкозу).

Среди промышленных продуцентов микробных целлюлаз ведущую роль играют различные виды грибов рода Trichoderma (Т. reesei, Т. viride, Т. longibrachiatum). Это обусловлено высокой секреторной способностью их клеток, а также разнообразием продуцируемых ферментов с различной субстратной специфичностью, что делает эти продуценты универсальным объектом для получения различного рода биотехнологических продуктов.

Препараты целлюлаз на основе грибов Trichoderma выпускаются во многих странах ведущими компаниями – производителями промышленных ферментов, в частности Novozymes (Дания), Genencor International (США), Iogen (Канада), PrimAlko (Финляндия), Meiji Seika Kaisha Ltd. и Shin Nihon Chemical Co. (Япония) и др.

В пищевой промышленности целлюлазы используют для осветления соков, в пивоварении. Кроме того, целлюлолитические ферменты активно используются в целлюлозно-бумажной промышленности, в сельском хозяйстве (в процессе приготовления силоса). После полного гидролиза целлюлозу можно использовать как дешевый источник глюкозы.



Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 19 |
 

Похожие работы:

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Оренбургский государственный университет Г.И. КОБЗЕВ ПРИМЕНЕНИЕ НЕЭМПИРИЧЕСКИХ И ПОЛУЭМПИРИЧЕСКИХ МЕТОДОВ В КВАНТОВО-ХИМИЧЕСКИХ РАСЧЕТАХ Рекомендовано Ученым советом государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования “Оренбургский государственный университет” в качестве учебного пособия для студентов обучающихся по программам...»

«Фактический адрес: 127055, г. Москва, ул. Новослободская, дом 62, корпус 19 Тел/факс: (495) 221-21-95, (499) 973-93-88, 972-16-16 E-mail: zakaz@aliansbook.ru Прайс-лист на 18.11.08 Цена Код Заказ Стр Название Автор Изд-во Гуманитарные науки Педагогика 502781 Педагогика физической культуры: Учебник. Гриф УМО П Прохорова М.В., Сидоров Альянс временно нет А.А., Синюхин Б. Иностранные языки Альянс временно Серебренникова Н.И. нет 517140 Английский язык для химиков П Круглякова И.Е. Альянс Михельсон...»

«МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ И СОЦИАЛЬНОГО РАЗВИТИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования ИРКУТСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации А.Н. Калягин ВОЕННО-ПОЛЕВАЯ ТЕРАПИЯ Учебное пособие для студентов медицинских вузов, обучающихся по специальности Медицинская биохимия Иркутск 2011 УДК 616.1/.7 ББК 54.1 К 17 Печатается по решению Центрального...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации Сыктывкарский лесной институт (филиал) федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования СанктПетербургский государственный лесотехнический университет имени С. М. Кирова КАФЕДРА ОБЩЕЙ И ПРИКЛАДНОЙ ЭКОЛОГИИ П. В. Мусихин НАУЧНЫЕ ОСНОВЫ ЭКОЛОГИЧЕСКОЙ ХИМИИ ПРИРОДНЫХ РЕСУРСОВ Учебное пособие Утверждено учебно-методическим советом Сыктывкарского лесного института в качестве учебного...»

«И.Е. Шиманович, Е.И. Василевская, Е.И. Шарапа, А.П. Ельницкий, В.В. Боган Химия в 9 классе Учебно-методическое пособие для учителей учреждений общего среднего образования с русским и белорусским языками обучения Общее количество страниц Общее количество иллюстраций – Дата марта 2012 г. Подпись авторов: И.Е. Шиманович Е.И. Василевская Е.И. Шарапа А.П. Ельницкий В.В. Боган Минск, 2012 3 Предисловие Предлагаемое учебно-методическое пособие адресовано учителям, работающим по новому учебнику Химия...»

«Донецкий национальный медицинский университет им. М.Горького. Кафедра медицинской химии. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ к практическим занятиям по биоорганической химии (для студентов первого курса стоматологического факультета). Донецк - 2011 Методические указания подготовили: -зав. кафедрой доцент Рождественский Е.Ю. -доценты: Сидун М.С., Селезнева Е. В. -ст. преподаватель Павленко В.И. -ассистенты кафедры: Бусурина З.А., Сидоренко Л.М., Игнатьева В.В., Бойцова В.Е. -2Вступление. Целью развития...»

«ИНСТРУМЕНТАЛЬНЫЙ АНАЛИЗ учебное пособие для химико-технологических специальностей профессиональных центров Йыхви, 2012 INSTRUMENTAALANALS Kesolev ppematerjal on valminud „Riikliku struktuurivahendite kasutamise strateegia 2007ja sellest tuleneva rakenduskava „Inimressursi arendamine” alusel prioriteetse suuna „Elukestev pe” meetme „Kutseppe sisuline kaasajastamine ning kvaliteedi kindlustamine” programmi Kutsehariduse sisuline arendamine 2008-2013” raames. ppematerjali autorid: Valentina...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ГОСУДАРСТВЕННОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ЭКОНОМИКИ И ФИНАНСОВ КАФЕДРА СИСТЕМ ТЕХНОЛОГИЙ И ТОВАРОВЕДЕНИЯ СИСТЕМЫ ТЕХНОЛОГИЙ Рабочая программа, темы контрольных работ и методические указания по их выполнению для студентов I курса заочной формы обучения ИЗДАТЕЛЬСТВО САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА ЭКОНОМИКИ И ФИНАНСОВ Рекомендовано...»

«Министерство образования и науки Российской Федерации Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования Тамбовский государственный технический университет В.Е. ГАЛЫГИН, Г.С. БАРОНИН, В.П. ТАРОВ, Д.О. ЗАВРАЖИН СОВРЕМЕННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ И ПЕРЕРАБОТКИ ПОЛИМЕРНЫХ И КОМПОЗИЦИОННЫХ МАТЕРИАЛОВ Рекомендовано Учёным советом университета в качестве учебного пособия для студентов, обучающихся по направлениям 150100 – Материаловедение и технологии...»

«МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ СЫКТЫВКАРСКИЙ ЛЕСНОЙ ИНСТИТУТ (ФИЛИАЛ) ФЕДЕРАЛЬНОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО БЮДЖЕТНОГО ОБРАЗОВАТЕЛЬНОГО УЧРЕЖДЕНИЯ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ЛЕСОТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМЕНИ С. М. КИРОВА КАФЕДРА ОБЩЕЙ И ПРИКЛАДНОЙ ЭКОЛОГИИ Посвящается 60-летию высшего профессионального лесного образования в Республике Коми ТОКСИКОЛОГИЯ Учебное пособие Утверждено учебно-методическим советом Сыктывкарского лесного...»




 
© 2013 www.dis.konflib.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.