WWW.DIS.KONFLIB.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 
<< HOME
Научная библиотека
CONTACTS

Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 22 |

5 9 3 минаева любовь валерьевна ^/-/emaci^cl^ эксперртментальная оценка роли изменений системы глутатиона в реализации побочных цитотоксических эффектов повторного введения цржлофо

-- [ Страница 1 ] --

ВОЕННО-МЕДИЦИНСКАЯ АКАДЕМИЯ

им. С М. Кирова

На правах рукописи

'Oi.200.7 1 5 5 9 3 МИНАЕВА

Любовь Валерьевна ^/-/eMaci^cL^

ЭКСПЕРРТМЕНТАЛЬНАЯ ОЦЕНКА РОЛИ ИЗМЕНЕНИЙ СИСТЕМЫ

ГЛУТАТИОНА В РЕАЛИЗАЦИИ ПОБОЧНЫХ ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ

ЭФФЕКТОВ ПОВТОРНОГО ВВЕДЕНИЯ ЦРЖЛОФОСФАНА

14.00.20 - токсикология, 03.00.04 - биохимия Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Научные руководители:

доктор медицинских наук профессор А.И.Карпищенко кандидат медицинских наук С.И.Глушков

САНКТ- ПЕТЕРБУРГ

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ \Л. Системаглутатиона и ее биологическое значение 1.2. Особенности токсикокинетики и токсикодинамики циклофосфана Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Выбор и содержание животных 2.2.Моделирование повторной интоксикации циклофосфаном и ее экспериментальная терапия 2.3. Характеристика использованных фармакологических препаратов 2.4. Получение образцов тканей для исследований 2.5. Определение показателей системы глутатиона и продуктов перекисного окисления липидов в эритроцитах и в тканях лабораторных животных 2.6. Определение маркеров гепато- и нефротоксичности в сыворотке крови экспериментальных животных 2.7. Гистологическое исследование тканей печени и почек эксперименталь­ ных животных 2.8.Статистическая обработка результатов

Глава 3. ОБМЕН ГЛУТАТИОНА И ПРОЦЕССЫ ПЕРЕКИСНОГО

ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В ТКАНЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ

ЖИВОТНЫХ ПРИ ПОВТОРНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ

ЦИКЛОФОСФАНОМ 3.1. Концентрации восстановленного глутатиона и сульфгидрильных групп белков в тканях печени, почек, головного мозга экспериментальных живот­ ных 3.2. Активность ферментов системы глутатиона в тканях печени, почек, головного мозга экспериментальных животных 3.2. Активность ферментов системы глутатиона в тканях печени, почек, головного мозга экспериментальных животных 3.3. Концентрация продуктов перекисного окисления липидов в тканях печени, почек, головного мозга экспериментальных животных 3.4. Морфологическая картина тканей печени и почек экспериментальных животных 3.5. Показатели системы глутатиона и интенсивности процессов перекисного окисления липидов в эритроцитах экспериментальных животных

Глава 4. ВЛИЯНИЕ СРЕДСТВ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКОЙ КОРРЕКЦИИ НА

СОСТОЯНИЕ СИСТЕМЫ ГЛУТАТИОНА И РТНТЕНСИВНОСТЬ

ПРОЦЕССОВ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В ТКАНЯХ

ПЕЧЕНИ ПОЧЕК, ГОЛОВНОГО МОЗГА И ЭРИТРОЦИТАХ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ ПРИ ПОВТОРНОМ ВВЕДЕНИИ

ЦИКЛОФОСФАНА 4.L Влияние средств фармакологической коррекции на концентрацию восстановленного глутатиона и сульфгидрильных групп белков в тканях печени, почек, головного мозга и эритроцитах при повторном введении циклофосфана 4.2. Влияние средств фармакологической коррекции на активность ферментов системы глутатиона в тканях печени, почек головного мозга и эритроцитах при повторном введении циклофосфана 4.3. Влияние средств фармакологической коррекции на концентрацию продуктов перекисного окисления липидов в тканях печени, почек головного 4.4. Влияние средств фармакологической коррекции на изменение лабораторных показателей гепато- и нефротоксичности экспериментальных животных при повторном введении циклофосфана 4.5. Влияние средств фармакологической коррекции на морфологические изменения в тканях печени и почек экспериментальных животных при

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АДФ аденозиндифосфорная кислота АДФРТ аденозиндифосфатрибозил - трансфераза цАМФ циклический аденозин-3',5'-монофосфат АЛТ Аланинаминотрансфераза ACT аспартатаминотрансфераза АТФ аденозинтрифосфорная кислота АФК активные формы кислорода ВГ восстановленный глутатион ГАМК у-аминомасляная кислота Г ДАР глутатион: дегидроаскорбат-оксидоредуктаза ГГТП у-глутамилтрансфераза ГП Se-зависимая глутатионпероксидаза ГТ глутатион-8-трансфераза Г-6-Ф-ДГ.... глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа ДНК дезоксирибонуклеиновая кислота ДТНБ 5,5'-дитио-бис (2-нитробензойная кислота) Н АД^ никотинамидадениндинуклеотид окисленный НАД Н никотинамидадениндинуклеотид восстановленный НАДФ* никотинамидадениндинуклеотидфосфат окисленный НАДФН никотинамидадениндинуклеотидфосфатвосстановленный ПОЛ перекисное окисление липидов РНК рибонуклеиновая кислота СГ сульфгидрильные группы белков СОД Супероксиддисмутаза СРО свободнорадикальное окисление ТБК 2-тиобарбитуровая кислота ТНБ 5-тио,2-нитробензойная кислота ТРИС трис(гидроксиметил)аминометан ТХУ трихлоруксусная кислота ХДНБ 1 -хлор-2,4-динитробензол ЦНС центральная нервная система ЦФ Циклофосфан ЩФ щелочная фосфатаза ЭДТА этилендиаминтетраз^ссусная кислота Н2О2 перекись водорода Oi Кислород Ог супероксидный анион

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность. В течение последних 25-30 лет темп роста заболевае­ мости злокачественными опухолями превысил годовой темп прироста миро­ вого населения. В России с 1992 по 2001 гг. показатель заболеваемости зло­ качественными новообразованиями возрос с 271,8 до 313,9 на 100 тысяч на­ селения. Прирост заболеваемости за десятилетие составил более 16%, при ежегодном темпе - 1,7%[54]. В связи с этим поиск адекватной противоопу­ холевой терапии заслуживает пристального внимания и требует решения ря­ да проблем, связанных, прежде всего, с ранней диагностикой и коррекцией побочных токсических эффектов действия химиотерапевтических препара­ тов [6].



Циклофосфан (ЦФ) - алкилирующий цитостатический препарат, об­ ладающий относительно широким противоопухолевым спектром действия.

В терапии ряда заболеваний используется как иммунодепрессивное средст­ во. Однако его применение ограничивается побочными эффектами, такими как гепатотоксичность, нефротоксичность, гематотоксичность, мутаген­ ность. Препарат обладает очень высокой кумуляцией и низкой обратимо­ стью токсического действия [9,16,53,67].

Активация ЦФ происходит под действием микросомальных монооксигеназ в различных тканях организма, преимущественно в гепатоцитах, в результате чего накапливаются его реакционно-способные метаболиты, ко­ торые вступают в реакции алкилирования, преимущественно, с нуклеиновы­ ми кислотами, что и лежит в основе механизма действия данного препарата.

Восстановленный глутатион, конъюгируя под действием ГТ с активными метаболитами ЦФ, обезвреживает их, необратимо при этом расходуясь.

Кроме того, с цитохрома Р450 возможна утечка активных форм кислорода, в обезвреживании которых также принимает участие система глутатиона [9,31,34,122].

Таким образом, исследование системы глутатиона при повторном введении циклофосфана в малых дозах позволяет более подробно изучить молекулярные механизмы токсического действия ЦФ и его метаболитов, ку­ мулятивный эффект, а также биохимические механизмы его детоксикации.

Целью исследования явилось изучение состояния системы глутатиона в тканях печени, почек, головного мозга и в эритроцитах лабораторных жи­ вотных при повторном введении циклофосфана для определения возможно­ сти использования показателей обмена глутатиона в качестве лабораторных тестов оценки тяжести цргготоксических эффектов химиотерапии, а также при поиске новых средств цитопротекции.

Для достижения поставленной цели предстояло решить следующие за­ дачи исследования:

- определить динамику изменений состояния системы глутатиона и процессов перекисного окисления липидов в различных органах белых бес­ породных крыс при повторном введении циклофосфана в суточных дозах и 40 мг/кг в течение 1-10 суток;

- исследовать влияние предшественника синтеза глутатиона (ацетилцистеина), препаратов окисленного глутатиона (глутоксима, литана), антигипоксанта (трисана), антиоксидантов (мексидола, цитофлавина) на динами­ ку изменений показателей системы глутатиона и интенсивность процессов перекисного окисления липидов при повторном введении циклофосфана в суточной дозе 20 мг/кг в течение 10 суток;

- оценить информативность изменений показателей системы глутатио­ на в эритроцитах для оценки степени тяжести цитотоксического поврежде­ ния тканей внутренних органов в условиях повторного введения циклофос­ фана.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. В ответ на повторное введение циклофосфана в дозах 20, 40 мг/кг в ткани печени и в эритроцитах лабораторных животных отмечается ак­ тивация обмена глутатиона. По мере увеличения дозовой нагрузки развива­ ются нарушения состояния системы глутатиона и цитотоксические повреж­ дения ткани печени, что подтверждается и выраженными морфологическими изменениями.

2. Ведущ;им показателем нарушений обмена глутатиона при повтор­ ных отравлениях циклофосфаном является снижение активности глюкозо-6фосфатдегидрогеназы.

3. Для проведения фармакологической коррекции цитотоксических повреждений ткани печени при повторном введении циклофосфана можно рассматривать применение препарата предшественника синтеза глутатиона (ацетилцистеина), препарата окисленного глутатиона (глутоксима), антиоксиданта (мексидола).

4. Определение показателей характеризующих обмен глутатиона в клетках красной крови имеет диагностическое значение для оценки цитотоксического поражения тканей печени в условиях повторного введения цикло­ фосфана.

Научная новизна. На основе проведенной комплексной оценки показа­ телей системы глутатиона, сопряженных биохимических процессов в разлрршых тканях экспериментальных животных (печень, почки, головной мозг, эритроциты) при повторном введении циклофосфана показана взаимосвязь между выраженностью изменений естественной системы цитопротекции и цитотоксическими свойствами ксенобиотика. Проведен анализ причин, вы­ зывающих изменения состояния системы глутатиона и активацию процессов перекисного окисления липидов в исследуемых тканях при повторном вве­ дении циклофосфана. Установлено, что использование в эксперименте фар­ макологических препаратов (ацетилцистеина, глутоксима, мексидола) в ус­ ловиях повторного введения циклофосфана в дозе 20 мг/кг в течение 10 суток предотвращает развитие патобиохимических процессов и реализацию цитотоксических повреждений тканей паренхиматозных органов. Показана перспективная возможность использования ряда показателей системы глутатиона (активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, глутатионредуктазы, концентрации диеновых конъюгатов, малонового диальдегида) в эритроци­ тах для установления степени тяжести интоксикации и эффективности коррекционной терапии.

Практическое значение работы заключается в том, что для оценки сте­ пени тяжести цитотоксического поражения паренхиматозных органов и эф­ фективности фармакологической коррекции этого процесса у лиц, проходя­ щих курс полихимиотерапии представляется возможным, по данным диссер­ тационного исследования, использовать показатели системы глутатиона (ак­ тивности Г-6-Ф-ДГ, ГР, концентрации ДК, МДА).

Реализация результатов исследования. Рекомендации, разработанные на основании полученных в ходе диссертационного исследования данных, используются в научной работе и учебном процессе на кафедре клинической биохимии и лабораторной диагностики и кафедре военной токсикологии и медицинской защиты Военно-медицинской академии.



Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 22 |
 

Похожие материалы:

« ЛАРИОНОВ АЛЕКСЕЙ ВИКТОРОВИЧ РАЗНООБРАЗИЕ СТЕПНОЙ РАСТИТЕЛЬНОСТИ НА ГРАДИЕНТЕ КОНТИНЕНТАЛЬНОСТИ КЛИМАТА В ХАКАСИИ 03.00.05 – БОТАНИКА Научный руководитель Ермаков Николай Борисович д.б.н., с.н.с. Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Новосибирск - 2014 2 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ Актуальность исследования Цели и задачи исследования Защищаемые положения Научная новизна Практическая значимость Апробация работы и публикации Благодарности ГЛАВА 1. ...»

«Кочерина Наталья Викторовна АЛГОРИТМЫ ЭКОЛОГО-ГЕНЕТИЧЕСКОГО УЛУЧШЕНИЯ ПРОДУКТИВНОСТИ РАСТЕНИЙ Специальность 03.00.15 – Генетика Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук, профессор, академик РАСХН В. А. Драгавцев Санкт–Петербург – 2009 2 Оглавление Глава I. Введение…………………………………………………….……….…4 О реальной природе организации сложных полигенных экономически важных признаков растений…….……………………9 Глава II. Постановка задач ...»

« ГАЛКИНА МАРИЯ АНДРЕЕВНА БИОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ИНВАЗИОННЫХ ВИДОВ РОДА BIDENS L. В ЕВРОПЕЙСКОЙ ЧАСТИ РОССИИ 03.02.01 – БОТАНИКА ДИССЕРТАЦИЯ НА СОИСКАНИЕ УЧЕНОЙ СТЕПЕНИ КАНДИДАТА БИОЛОГИЧЕСКИХ НАУК Научный руководитель д.б.н. Виноградова Ю.К. Москва – 2014 2 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение ……………………………………………………………………….4 Глава 1. Объекты и методы ………………………………………………….10 Глава 2. История распространения инвазионных видов рода Bidens L. на территории Европы …………………………………… Глава 3. ...»

« Никитенко Елена Викторовна МАКРОЗООБЕНТОС ВОДОЕМОВ ДОЛИНЫ ВОСТОЧНОГО МАНЫЧА 03.02.10 – гидробиология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, Щербина Георгий Харлампиевич Борок – 2014 СОДЕРЖАНИЕ ВВЕДЕНИЕ 3 ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 8 ГЛАВА 2. ФИЗИКО–ГЕОГРАФИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАЙОНОВ ИССЛЕДОВАНИЯ 17 ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 36 ГЛАВА 4. МАКРОЗООБЕНТОС ВОДОЕМОВ ДОЛИНЫ ВОСТОЧНОГО ...»

« Вознийчук Ольга Петровна ПРОСТРАНСТВЕННАЯ СТРУКТУРА И ОРГАНИЗАЦИЯ НАСЕЛЕНИЯ НАЗЕМНЫХ ПОЗВОНОЧНЫХ ЦЕНТРАЛЬНОГО АЛТАЯ 03.02.04 – зоология Диссертация на соискание учёной степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Ю.С. Равкин Горно-Алтайск – 2014 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………….….….4 ГЛАВА 1. ИСТОРИЯ ИЗУЧЕНИЯ, РАЙОН РАБОТ, МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ………………………….…………………………….…………….….9 1.1. История изучения фауны Центрального ...»

« ТОКРАНОВ АЛЕКСЕЙ МИХАЙЛОВИЧ ОСОБЕННОСТИ БИОЛОГИИ ДОННЫХ И ПРИДОННЫХ РЫБ РАЗЛИЧНЫХ СЕМЕЙСТВ В ПРИКАМЧАТСКИХ ВОДАХ 03.00.10 – ихтиология Диссертация в виде научного доклада на соискание ученой степени доктора биологических наук Петропавловск-Камчатский – 2009 2 Официальные оппоненты: доктор биологических наук, член-корреспондент РАН Черешнев Игорь Александрович доктор биологических наук Долганов Владимир Николаевич доктор биологических наук, профессор Шунтов Вячеслав Петрович ...»




 
© 2013 www.dis.konflib.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.