WWW.DIS.KONFLIB.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 
<< HOME
Научная библиотека
CONTACTS

Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 18 |

Характеристика клинически значимых биологических свойств возбудителя туберкулеза, выделенного из резецированных участков легких больных туберкулезом

-- [ Страница 1 ] --

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

УРАЛЬСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ

ФТИЗИОПУЛЬМОНОЛОГИИ

На правах рукописи

БЕЛОУСОВА КСЕНИЯ ВАЛЕРЬЕВНА

ХАРАКТЕРИСТИКА КЛИНИЧЕСКИ ЗНАЧИМЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ

СВОЙСТВ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУБЕРКУЛЕЗА, ВЫДЕЛЕННОГО ИЗ

РЕЗЕЦИРОВАННЫХ УЧАСТКОВ ЛЕГКИХ БОЛЬНЫХ

ТУБЕРКУЛЕЗОМ

03.02.03 – микробиология

ДИССЕРТАЦИЯ

на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Научные руководители:

д.м.н. Скорняков Сергей Николаевич к.б.н. Кравченко Марионелла Анатольевна Екатеринбург –

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ЛЕКАРСТВЕННАЯ УСТОЙЧИВОСТЬ МИКОБАКТЕРИЙ

ТУБЕРКУЛЕЗА (обзор литературы)

1.1. История формирования представлений о лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза

1.2. Классификация лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза

1.3. Молекулярно-генетические механизмы устойчивости микобактерий туберкулеза к лекарственным препаратам

1.4. Методы диагностики лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза

1.4.1. Культуральные методы определения лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза

1.4.2. Молекулярно-генетические методы определения лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза

Резюме

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Общая характеристика материалов исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Бактериологические методы исследования

2.2.2. Молекулярно-генетические методы исследования

2.2.2.1. Выделение ДНК микобактерий туберкулеза из клинического материала и лизирование культур микобактерий туберкулеза

2.2.2.2. Обнаружение ДНК M. tuberculosis complex методом ПЦР в режиме реального времени (ПЦР-РВ)

2.2.2.3. Определение ЛЧ МБТ к изониазиду, рифампицину и фторхинолонам методом биочипов

2.2.2.4. Типирование культур M. tuberculosis методом MIRU-VNTR......... 2.2.3. Методы статистической обработки результатов исследований........ Резюме

Глава 3. РОЛЬ КУЛЬТУРАЛЬНЫХ И МОЛЕКУЛЯРНОГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ВЫЯВЛЕНИЯ МИКОБАКТЕРИЙ

ТУБЕРКУЛЕЗА И ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИХ ЛЕКАРСТВЕННОЙ

ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ РЕЗЕЦИРОВАННЫХ

УЧАСТКОВ ЛЕГКИХ И РЕСПИРАТОРНОГО МАТЕРИАЛА.............. Выявляемость микобактерий туберкулеза и определение их 3.1.

лекарственной чувствительности культуральными методами

Выявляемость микобактерий туберкулеза и определение их 3.2.

лекарственной чувствительности молекулярно-генетическими методами. 3.3. Сравнительная оценка бактериологических и молекулярно-генетических методов исследования

3.4. Алгоритм бактериологического исследования резецированных участков легких

Резюме

Глава 4. СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ

ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУБЕРКУЛЕЗА, ВЫДЕЛЕННОГО ИЗ

РЕЗЕЦИРОВАННЫХ УЧАСТКОВ ЛЕГКИХ И РЕСПИРАТОРНОГО

МАТЕРИАЛА

4.1. Сравнительный анализ скорости и массивности роста микобактерий туберкулеза, выделенных из операционного и респираторного материала, полученных на хирургическом этапе лечения больных

4.2. Сравнительный анализ лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза, выделенных из операционного и респираторного материала, полученных на хирургическом этапе лечения больных

4.3.

операционного и респираторного материала, полученных на хирургическом этапе лечения больных

4.4. Сравнительный анализ лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза, выделенных из операционного и респираторного материала, полученного на терапевтическом этапе лечения больных

Резюме

Глава 5. АНАЛИЗ ВАРИАНТОВ МУТАЦИЙ, ОТВЕТСТВЕННЫХ ЗА

ЛЕКАРСТВЕННУЮ УСТОЙЧИВОСТЬ МИКОБАКТЕРИЙ

ТУБЕРКУЛЕЗА, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ РЕЗЕЦИРОВАННЫХ УЧАСТКОВ

ЛЕГКИХ

Резюме

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

В настоящее время эффективность химиотерапии, которая является главным средством лечения туберкулеза, остается невысокой. Одной из основных причин этого является лекарственная устойчивость (ЛУ) микобактерий туберкулеза (МБТ). Проблема ЛУ возбудителя туберкулза приобрела в последнее время глобальное значение [10, 73, 104, 218].

Клиническое излечение у впервые выявленных больных с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) МБТ остается низким и составляет в Российской Федерации 16,2%, что в 3,1 раза ниже уровня клинического излечения туберкулеза у больных с лекарственно чувствительным (ЛЧ) возбудителем туберкулеза [104]. В то же время, у значительного числа пациентов на этапах терапевтического лечения получить сведения о ЛЧ возбудителя к противотуберкулзным препаратам (ПТП) невозможно в силу ограниченности и олигобактериальности процесса.



При туберкулмах обнаружение МБТ в мокроте и промывных водах бронхов (ПВБ) составляет около 10,0% [75]. При посеве резецированного участка легкого выявление МБТ достигает 24,2% - 57,9% [32, 74]. При бактериологическом исследовании резецированных участков легких выявляется от 16,0% до 49,0% МБТ с ЛУ [27, 32]. Свойства возбудителя необходимости назначения больным адекватной химиотерапии.

В связи с тем, что классические бактериологические методы обнаружения, идентификации и определения ЛЧ МБТ требуют длительного времени (до 3-х месяцев), а также весьма ресурсоемки, в последние годы активно применяются молекулярно-генетические методы, лишенные перечисленных недостатков [5, 20, 21, 150].

Изучение резецированного участка легкого дает наиболее полные сведения об особенностях процесса, возбудителе заболевания, его видовой принадлежности, чувствительности к ПТП и эффективности лечения.

Значение бактериологических и молекулярно-генетических методов исследования резецированного участка легкого определяется необходимостью проведения послеоперационного курса химиотерапии с учетом данных о возбудителе и его чувствительности к ПТП.

Все это определяет актуальность обсуждаемой проблемы, цель и задачи данной работы.

Цель работы. Изучение клинически значимых биологических свойств возбудителя туберкулеза, выделенного из резецированных участков лгких.

1. Оценить роль культуральных и молекулярно-генетических методов выявления микобактерий туберкулеза и определения их лекарственной чувствительности при исследовании резецированных участков легких и респираторного материала (мокроты, промывных вод бронхов), полученных от больных, находящихся на хирургическом этапе лечения туберкулеза.

2. Провести сравнительный анализ клинически значимых биологических свойств (лекарственная чувствительность, массивность и скорость роста) возбудителя туберкулза, выделенного из резецированных участков легких и респираторного материала, полученного на терапевтическом и хирургическом этапах лечения больных.

3. Провести анализ вариантов мутаций, ответственных за лекарственную устойчивость, у микобактерий туберкулеза, выделенных из резецированных участков легких.

4. Разработать алгоритм бактериологического исследования резецированных участков легких больных, перенесших хирургический этап лечения по поводу туберкулза легких.

Личное участие автора в получении научных результатов, изложенных в диссертации, осуществлялось на всех этапах работы и выразилось в проведении научно-информационного поиска, анализе и обобщении данных специальной литературы, в разработке дизайна исследования, в сборе и подготовке диагностического материала для проведения комплекса бактериологических и молекулярно-генетических исследований, в проведении лично автором всех молекулярно-генетических исследований, статистической обработке и систематизации результатов работы. Автором разработан алгоритм бактериологического исследования резецированных участков легких, сформулированы основные положения и выводы диссертационной работы. Автор принимал непосредственное участие во внедрении в практику бактериологического исследования резецированных участков легких как обязательного этапа диагностики и контроля химиотерапии туберкулеза.

операционного материала больных туберкулезом легких молекулярногенетическими методами. Показана возможность исследования операционного материала методом биочипов, а также установлена высокая частота совпадений результатов определения лекарственной устойчивости МБТ к изониазиду и рифампицину методом биочипов и методом абсолютных концентраций при исследовании резецированных тканей легких. Впервые представлен анализ вариантов мутаций, обуславливающих лекарственную устойчивость МБТ, полученных из операционного материала, в результате которого показана частота встречаемости выявленных мутаций. Выявлена биологического материала.

Научная новизна исследований подтверждается получением патента РФ на промышленный образец «Схема проведения исследования резецированных участков легких» № 82727 от 16 августа 2012 г.

Практическая и теоретическая значимость диссертационной работы, позволили обосновать необходимость бактериологического исследования резецированных участков легких как обязательного этапа диагностики и контроля химиотерапии туберкулеза и внедрить исследование операционного материала в клинико-лабораторную практику ФГБУ «Уральский НИИ фтизиопульмонологии» г. Екатеринбурга, ГБУЗ Свердловской области «Противотуберкулезный диспансер» г.

противотуберкулезный диспансер» г. Челябинска.

Полученные данные позволили оценить роль бактериологических и молекулярно-генетических методов выявления МБТ и определения их ЛЧ при исследовании резецированных участков легких и респираторного материала и включить материалы исследования в программы последипломной подготовки фтизиопульмонологии» г. Екатеринбурга и в учебные курсы кафедры фтизиатрии, пульмонологии и торакальной хирургии ГБОУ ВПО «Уральский государственный медицинский университет» Минздрава России г.

Екатеринбурга.

Кроме того, результаты исследования вошли в проект концепции по химиотерапии туберкулеза в Российской Федерации (приложение №4) [45].

фтизиопульмонологии» Минздрава России в период с 2010 по 2013 годы.

Материалом исследования служили:

1. Результаты ретроспективного анализа первичной медицинской документации больных, прооперированных в клинике Уральского НИИ фтизиопульмонологии по поводу туберкулеза легких в 2010-2011 гг. (n=291).

2. Результаты проспективного исследования резецированных участков легких (n=291), мокроты и промывных вод бронхов (n=219) от оперированных больных по поводу туберкулеза легких; культуры МБТ (n=102), выделенные из мокроты и резецированных участков легких оперированных больных по поводу туберкулеза легких.



Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 18 |
 

Похожие материалы:

« КОРОЛЕВА Ольга Владимировна ЛАККАЗЫ БАЗИДИОМИЦЕТОВ: СВОЙСТВА, СТРУКТУРА, МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ И ПРАКТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ 03.00.04 – Биохимия ДИССЕРТАЦИЯ в виде научного доклада на соискание ученой степени доктора биологических наук Москва 2006 Работа выполнена в группе Ферментативные основы биодеградации Института биохимии им. А.Н. Баха РАН Официальные оппоненты: доктор биологических наук, профессор Феофилова Елена Петровна доктор химических наук, профессор Савицкий Александр ...»

«ТИТОВА СВЕТЛАНА АНАТОЛЬЕВНА Влияние фитопатогенных микроорганизмов на энзиматическую активность растения-хозяина Glycine max (L.) Merr. и Glycine soja Sieb. et Zucc. 03.02.08 - ЭКОЛОГИЯ Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: к.б.н., доцент Семенова Е.А. БЛАГОВЕЩЕНСК – 2014 1 Оглавление Введение………………………………………………………………………. 4 1 Аналитический обзор литературы……………………………………… 8 1.1 Вредоносность и распространение болезней сои………………………. 8 1.2 ...»

« Неуймин Сергей Иосифович ФЕНОТИПИЧЕСКИЕ ЗАКОНОМЕРНОСТИ И АЛГОРИТМЫ МЕХАНИЗМОВ РЯДОВОЙ ИЗМЕНЧИВОСТИ ВИДОВЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ РОДА AGROPYRON GAERTN. В РАЗНЫХ ЭКОТОПИЧЕСКИХ УСЛОВИЯХ Том 1 Специальность 03.02.01 – ботаника 03.02.08 – экология (биология) Диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук Научный консультант – доктор биологических наук Шавнин С.А. Екатеринбург – 2014 2 Оглавление ВВЕДЕНИЕ ………………………………….………………………………………. 5 Глава 1. ЗАКОНОМЕРНОСТИ И ...»

« Мязин Владимир Александрович РАЗРАБОТКА СПОСОБОВ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ БИОРЕМЕДИАЦИИ ПОЧВ КОЛЬСКОГО СЕВЕРА ПРИ ЗАГРЯЗНЕНИИ НЕФТЕПРОДУКТАМИ (В УСЛОВИЯХ МОДЕЛЬНОГО ЭКСПЕРИМЕНТА) 03.02.08 Экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель доктор биологических наук, профессор, Евдокимова Галина Андреевна Апатиты - 2014 СОДЕРЖАНИЕ Введение…………………………………………………………………………………….7 1. Обзор литературы………………………………………………………………………….12 1.1. ...»

« МОСКАЛЕНКО ОЛЬГА ЛЕОНИДОВНА ВЛИЯНИЕ ГОРОДСКОГО ТЕХНОГЕННОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ НА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЮНОШЕЙ 03.02.08 – экология (биология) (биологические науки) ДИССЕРТАЦИЯ на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Пуликов А.С. Красноярск 2014 2 ОГЛАВЛЕНИЕ Стр. ВВЕДЕНИЕ……………………………………………………………………. 5 ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………………. 12 1.1. Экологические условия и их влияние на ...»

« Аджиева Рада Башировна ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЙ АНАЛИЗ УСТОЙЧИВОСТИ АЛЬПИЙСКИХ РАСТЕНИЙ СЕВЕРО-ЗАПАДНОГО КАВКАЗА К ОТЧУЖДЕНИЮ НАДЗЕМНОЙ БИОМАССЫ 03.00.16 - экология Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель д.б.н., проф. В.Г. Онипченко Ставрополь - 2005 ОГЛАВЛЕНИЕ ВВЕДЕНИЕ 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 2. ФИЗИКО-ГЕОГРАФИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ РАЙОНА РАБОТ 17 2.1. Географическое положение 17 2.2. Климат 17 2.3. Почвы 18 2.4. Общая характеристика ...»

« Дмитриева Алла Викторовна НАСЛЕДСТВЕННЫЕ АНГИОНЕВРОТИЧЕСКИЕ ОТЕКИ: ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ, ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА 14.03.09 – клиническая иммунология, аллергология 03.02.07 – генетика Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Научные руководители: Доктор медицинских наук, профессор Т.В. Латышева Доктор биологических наук, профессор А.В. Поляков МОСКВА - 2011 1 Оглавление Список сокращений 4 Введение 5 Глава I. Обзор литературы 9 1.1. ...»

« КУНАНБАЕВ Кайрат Кайырбекович САПРОФИТНЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ ЧЕРНОЗЕМА ЮЖНОГО КАРБОНАТНОГО ПОД ВЛИЯНИЕМ ГЕРБИЦИДОВ В ЗАСУШЛИВЫХ УСЛОВИЯХ СЕВЕРНОГО КАЗАХСТАНА 03.02.08 – экология (биологические науки) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д-р биол. н., профессор, член-корреспондент Россельхозакадемии Н.Г. Власенко Новосибирск – 2013 2 ОГЛАВЛЕНИЕ Введение 4 Глава 1 Влияние пестицидов на микробоценоз почвы 9 1.1 Действие ...»

« Круглик Ольга Витальевна Реакция организма здоровых животных и животных с асцитной карциномой Эрлиха на воздействие сверхвысокочастотного электромагнитного излучения 03.02.08 (экология) Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук Научный руководитель: д.ф.-м.н., профессор Р.Г. Хлебопрос Красноярск, 2014 2 Список использованных сокращений АКЭ – асцитная карцинома Эрлиха АФК – активные формы кислорода БТШ – белок теплового шока ВДД – волны дециметрового ...»

« ЯКОВЛЕВ Роман Викторович Древоточцы (Ьер1^р1ега, Cossidae) Старого Света 03.02.05 - энтомология диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук САНКТ-ПЕТЕРБУРГ - 2014 2 Оглавление Оглавление Введение Глава 1. История изучения древоточцев (Lepidoptera, Cossidae) Старого Света 1.1. Периоды изучения древоточцев Старого Света 1.1.1. Начальный этап 1.1.2. Этап первых крупных обобщающих сводок и каталогов 1.1.3. Начальный этап специального исследования Cossidae ...»




 
© 2013 www.dis.konflib.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.