WWW.DIS.KONFLIB.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 
<< HOME
Научная библиотека
CONTACTS

Pages:     || 2 | 3 | 4 |

Структура вариабельного региона легких цепей иммуноглобулинов в патогенезе миеломной нефропатии

-- [ Страница 1 ] --

На правах рукописи

Горчакова

Светлана Владимировна

СТРУКТУРА ВАРИАБЕЛЬНОГО РЕГИОНА ЛЕГКИХ ЦЕПЕЙ

ИММУНОГЛОБУЛИНОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ МИЕЛОМНОЙ НЕФРОПАТИИ

14.01.21- Гематология и переливание крови

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

МОСКВА 2011 г.

2

Работа выполнена в Федеральном Государственном бюджетном учреждении Гематологический научный центр Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации Научные руководители:

доктор медицинских наук Бирюкова Людмила Семеновна кандидат медицинских наук Никитин Евгений Александрович

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор Голенков Анатолий Константинович доктор медицинских наук Головкина Лариса Леонидовна Ведущее научное учреждение:

Федеральное Государственное учреждение Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Защита диссертации состоится «29» июня 2011 года в 12 часов на заседании диссертационного совета Д 208.135.01 при Федеральном Государственном бюджетном учреждении Гематологический научный центр Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации по адресу 125167, Москва, Новый Зыковский проезд,

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ФГБУ Гематологического научного центра Минздравсоцразвития России.

Автореферат разослан «26»мая 2011 года

Ученый секретарь диссертационного совета к.м.н. Зыбунова Е.Е.

Введение Актуальность проблемы.

Нефропатия является ведущим клиническим проявлением при множественной миеломе (ММ). В момент диагностики ММ признаки почечной недостаточности (ПН) выявляют в 40-50% случаев [Herrera G.A. et al., 2004; Sanders P.W., 2005; EleutherakisPapaiakovou V. et al., 2007]. Главным патогенетическим звеном в развитии миеломной нефропатии является секреция легких цепей (ЛЦ) иммуноглобулинов, которые могут вызывать повреждения различных структур нефрона: как канальцев, так и клубочков.

Наиболее частым (в 63-87% случаях) вариантом поражения почек при ММ является цилиндровая нефропатия [Ronco P., Aucouturier P. et al., 2001].

Под термином «цилиндровая нефропатия» (миеломная нефропатия, cast nephropathy) понимают поражение почек вследствие формирования белковых преципитатов (цилиндров или слепков) в дистальных канальцах и собирательных трубках. Цилиндры вызывают обструкцию дистальных канальцев и собирательных трубочек, что приводит к интерстициальному воспалению и фиброзу. Клинически выявляют признаки уремии с высоким уровнем азотемии. Эффективное лечение ММ приводит к улучшению функции почек в 50% случаев цилиндровой нефропатии [Barosi G., Boccadoro M. et al., 2004].

Образование цилиндров происходит при взаимодействии CDR3 (англ.

complemetary-determining region) участка вариабельного домена ЛЦ и гликопротеида Тамма-Хорсфолля, секретируемого эпителием восходящего отдела петли Генле [Huang Z.Q., Sanders P.W., 1997].

В патогенезе нефротоксичности определяющее значение имеют физикохимические свойства ЛЦ, их тропность к различным отделам нефрона и степень адгезии [Solomon A. et al., 1991; Preudhomme J.L. et al., 1994; Stevens F.J. et al., 1999;

Sanders P.W., 2005]. В частности, известны случаи высокого уровня секреции белка Бенс-Джонса в течение длительного времени без нарушения функции почек [Sanders P.W., 2005]. В то же время при секреции ЛЦ в минимальном количестве может развиться тяжелое необратимое поражение почек. В экспериментальных исследованиях in vitro было обнаружено [Ying WZ, Sanders PW, 2001], что способность ЛЦ взаимодействовать с гликопротеидом Тамма-Хорсфолля различна и зависит от строения CDR3 участка вариабельного домена ЛЦ.

Таким образом, CDR3 участок вариабельного домена определяет нефротоксичные свойства легких цепей и их способность вызывать развитие цилиндровой нефропатии при ММ. Изучение строения CDR3 участка вариабельного домена во взаимосвязи с клиническими проявлениями ММ позволит углубить представления о патогенезе формирования цилиндровой нефропатии, а также степени обратимости почечной недостаточности в каждом конкретном случае.

Цель исследования.

Установить значение структуры вариабельного региона и конкретно CDR участка легких цепей и их изоэлектрической точки в патогенезе цилиндровой нефропатии у больных множественной миеломой.

Задачи исследования.

1. Определить нуклеотидные последовательности вариабельных регионов легких цепей, синтезируемых плазматическими клетками у больных множественной миеломой с цилиндровой нефропатией и без нее.

2. Провести анализ нуклеотидных и предсказанных аминокислотных последовательностей вариабельных регионов легких цепей, включающий:

• оценку репертуара используемых V и J генов легких цепей у больных множественной миеломой с цилиндровой нефропатией и без нее, • установление степени гомологии V генов легких цепей герминальным генам.

• расчет изоэлектрической точки для вариабельного региона и CDR3 каждой легкой цепи.

• сравнение вариабельных регионов у больных множественной миеломой с цилиндровой нефропатией и без нее, используя методы компьютерного моделирования.



3. Проанализировать вероятность развития цилиндровой нефропатии и тяжесть поражения на основании анализа нуклеотидной последовательности вариабельного региона легкой цепи.

4. Исследовать клинические и лабораторные факторы риска развития цилиндровой нефропатии.

Научная новизна.

Установлена первичная структура вариабельного региона и CDR3 легких цепей, а также их изоэлектрическая точка у пациентов с миеломной нефропатией и без нее. Изучено прогностическое значение этих показателей при развитии цилиндровой нефропатии. Выявлен репертуар используемых семейств генов вариабельного региона у пациентов с цилиндровой нефропатией и без нее.

Научно-практическая значимость работы.

В результате проведенных исследований многие данные получены впервые:

определены закономерности в использовании определенных семейств генов вариабельных регионов в синтезе легких цепей при множественной миеломе, установлено, что у пациентов с миеломной нефропатией и без нее нет различий в репертуаре используемых семейств генов вариабельных регионов. В результате проведенных исследований выявлено, что на основании первичной и вторичной структуры вариабельных регионов легких цепей, аминокислотного состава CDR3, изоэлектрической точки вариабельного региона легкой цепи и CDR3, невозможно установить их способность к образованию цилиндров с белком Тамма-Хорсфолля в почечных канальцах.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Для пациентов с множественной миеломой характерно использование специфического репертуара семейств генов вариабельного региона легких цепей. В группе V-генов достоверно чаще представлено I семейство. Среди J-генов чаще всего используется JII. В группе больных с секрецией лямбда легких цепей, преобладают V гены I и III семейств. Использование J –генов осуществляется только за счет II/III семейств.

2. Для пациентов с цилиндровой нефропатией характерно использование того же репертуара генов вариабельного региона легких цепей, что и для пациентов без цилиндровой нефропатии.

3. Гены вариабельного региона легких цепей, используемые миеломными клетками, совпадают с герминальными генами менее чем на 98%, что говорит о многочисленных мутациях. Накопление мутаций с заменой аминокислот в районах CDR свидетельствует о возможном контакте с антигеном.

4. На основании анализа первичной и вторичной структуры вариабельного региона легких цепей невозможно прогнозировать ее способность к образованию цилиндров с белком Тамма-Хорсфолля в почечных канальцах.

5. Развитие цилиндровой нефропатии коррелирует со стадией заболевания, определяемой по Durie-Salmon и по международной системе стадирования.

По теме диссертации опубликовано 5 научных работ.

Апробация диссертации:

Основные положения работы доложены в виде стендового доклада и опубликованы на Всемирном конгрессе по нефрологии (Италия, Милан, 2009г.).

World Congress of Nephrology. (Italy, Milan, 2009). «Amino Acid Sequence of the Variable Region of Light Chains in multiple myeloma patients». Работа апробирована на заседании проблемной комиссии (ФГБУ ГНЦ Минздравсоцразвития России, Москва, 1 марта 2010 года).

Объем и структура работы.

Диссертация изложена на 108 страницах, состоит из введения, обзора литературы, методической главы, главы собственных результатов, заключения, выводов, списка литературы. Работа иллюстрирована 19 таблицами, 2 рисунками, 8 схемами и фотографиями. Список литературы включает 143 источника: отечественные – 8, зарубежные – 135. Диссертация выполнена в отделении скорой медицинской помощи, полиорганной патологии и гемодиализа ФГБУ ГНЦ Минздравсоцразвития России (руководитель д.м.н. Л.С. Бирюкова), в лаборатории молекулярной гематологии ФГБУ ГНЦ Минздравсоцразвития России (заведующий лабораторией к.б.н. А.Б.

Судариков).

Материалы и методы исследования.

1. Общая характеристика больных, включенных в исследование.

В исследование включено 39 больных миеломной болезнью, проходивших лечение в ФГБУ ГНЦ Минздравсоцразвития России. Диагноз ММ был установлен в соответствии со стандартными клиническими, морфологическими и иммунохимическими критериями. Стадии заболевания определяли по B. J. M. Durie и S.E. Salmon (1975 г.), а также по международной системе стадирования (ISS).

Миеломная нефропатия была диагностирована у 22 (56,5%) больных. Группу сравнения составили 17 (43,5%) больных ММ, у которых миеломная нефропатия отсутствовала.

2. Выделение мононуклеаров из пунктата костного мозга.

Из костного мозга выделяли мононуклеары стандартным методом центрифугирования в градиенте плотности Ficoll-Hypaque. Мононуклеары костного мозга в количестве 106–107 мгновенно замораживали в жидком азоте и хранили при температуре -80оС.

3. Выделение РНК и обратная транскрипция.

Из замороженных мононуклеаров костного мозга выделяли РНК с помощью набора RNeasy Mini Kit (“Qiagen”) в соответствии с инструкцией производителя. Концентрацию определяли спектрофотометрически. Для обратной транскрипции использовали 2 мкг рибонуклеиновой кислоты (РНК) каждого образца. Одноцепочечную комплиментарную дезоксирибонуклеиновую кислоту (кДНК) синтезировали при помощи обратной транскриптазы M-MLV (“Promega”) и случайных гексануклеотидов в качестве праймеров.

4. Анализ генов легких цепей и.

Определение семейства ЛЦ и.

Для определения клональной перестройки вариабельного региона легких цепей (VL), кДНК амплифицировали отдельно для 7 семейств ЛЦ и 11 семейств ЛЦ. Для этого использовали праймеры, специфичные к VL-семействам (табл. 1).



Pages:     || 2 | 3 | 4 |
 

Похожие материалы:

«Джулакян Унан Левонович ЛИМФОЦИТОМА СЕЛЕЗЕНКИ (ЛИМФОМА ИЗ КЛЕТОК МАРГИНАЛЬНОЙ ЗОНЫ СЕЛЕЗЕНКИ): ДИАГНОСТИКА, ЛЕЧЕНИЕ 14.01.21 – гематология и переливание крови Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук МОСКВА – 2011 2 Работа выполнена в Федеральном Государственном бюджетном учреждении Гематологический научный центр Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации Научный руководитель: академик, доктор медицинских наук, профессор ...»

«ЦЫБЖИТОВА ЭРЖЕНА БАИРОВНА МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПЕРИФЕРИЧЕСКОГО ЗВЕНА ЭРИТРОНА БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЛЕГКИХ В ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ 14.01.21.– ГЕМАТОЛОГИЯ И ПЕРЕЛИВАНИЕ КРОВИ Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва, 2010 Работа выполнена в Учреждении Российской Академии Медицинских Наук Гематологический Научный Центр РАМН, в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования ...»

«АХУБА ЛАРИСА ОТАРОВНА ВЛИЯНИЕ ЛЕЙКОЦИТОВ НА РЕОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА КРОВИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ И ПРИ НЕКОТОРЫХ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ. 14.00.29 – Гематология и переливание крови Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва - 2008 2 Работа выполнена в Государственном учреждении Гематологический научный центр РАМН и Научно-исследовательском институте экспериментальной патологии и терапии Академии наук Абхазии. Научные руководители: доктор медицинских ...»

«ХАФИЗОВА ФЛЮРА АСХАТОВНА КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНОЕ И ИММУНОМОРФОЛОГИЧЕСКОЕ ОБОСНОВАНИЕ ТАКТИКИ ЛЕЧЕНИЯ РАЗНЫХ КЛИНИЧЕСКИХ ФОРМ ХРОНИЧЕСКОГО ТОНЗИЛЛИТА 14.01.03 – болезни уха, горла и носа 14.03.02 – патологическая анатомия Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва–2012 2 Работа выполнена в Уфимском филиале ФГБУ Научно-клинический центр оториноларингологии ФМБА России Научные консультанты: доктор медицинских наук, профессор Дайхес Николай Аркадьевич доктор ...»

«ГАСАНОВ Нуцалхан Гаджиевич ПРОФИЛАКТИКА СПАЕЧНОЙ БОЛЕЗНИ ПРИ ХИРУРГИЧЕСКОМ ЛЕЧЕНИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЕЙ ОРГАНОВ ЖИВОТА 14.01.17 – хирургия Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук Москва – 2012 1 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова (ректор – Заслуженный врач РФ, доктор медицинских наук, профессор ...»

«Макаров Сергей Николаевич Влияние методов коррекции расстройств микроциркуляции спинномозговых корешков и различных способов фиксации на исход оперативного лечения поясничного остеохондроза 14.01.15 - травматология и ортопедия 14.03.03 – патологическая физиология АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва 2014 PDF создан с пробной версией pdfFactory Pro www.pdffactory.com Работа выполнена в ФГБУ Центральный научно-исследовательский институт ...»

«Глечян Ануш Михайловна Клиническая эффективность периндоприла и его влияние на диастолическую функцию и ремоделирование левого желудочка, жесткость магистральных артерий и эндотелий – зависимую вазодилатацию у пациентов с артериальной гипертонией и сердечной недостаточностью c сохраненной систолической функцией левого желудочка. 14.01.05– кардиология 14.01.13 - лучевая диагностика, лучевая терапия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Москва, 2012 Работа ...»

«ШИЦ Ирина Витальевна ОСОБЕННОСТИ ЭЛЕМЕНТНОГО СТАТУСА БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН С ЭКСТАРГЕНИТАЛЬНОЙ ПАТОЛОГИЕЙ В УСЛОВИЯХ Г. ЯКУТСКА 14.00.16 – Патологическая физиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Якутск – 2006 2 Работа выполнена в Медицинском институте ГОУ ВПО Якутский государственный университет имени М.К. Аммосова Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Петрова Пальмира Георгиевна Научный консультант: доктор медицинских наук, ...»

«Хафисова Ольга Олеговна ВЛИЯНИЕ ГИПЕРХОЛЕСТЕРИНЕМИИ, ИНСУЛИНОРЕЗИСТЕНТНОСТИ И ЕЕ КОРРЕКЦИИ МЕТФОРМИНОМ НА ЭФФЕКТИВНОСТЬ КОМБИНИРОВАННОЙ ПРОТИВОВИРУСНОЙ ТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА С ПЕГИНТЕРФЕРОНОМ -2b И РИБАВИРИНОМ 14.01.04 – внутренние болезни Автореферат диссертации на соискание учёной степени кандидата медицинских наук Москва – 2011 Работа выполнена на кафедре госпитальной терапии и Центре изучения печени в ФГБОУ ВПО Российский университет дружбы народов НАУЧНЫЙ РУКОВОДИТЕЛЬ Огурцов Павел ...»

«ШАОВА ЛАРИСА ТЕУЧЕЖЕВНА ВОЗМОЖНОСТИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО СЕНСОРНОГО ТЕСТИРОВАНИЯ ДЛЯ ОЦЕНКИ СОМАТОСЕНСОРНОГО ПРОФИЛЯ ПРИ КОМПРЕССИОННОЙ РАДИКУЛОПАТИИ НАПОЯСНИЧНО-КРЕСТЦОВОМ УРОВНЕ И ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ПРЕГАБАЛИНА 14.03.06 – фармакология, клиническая фармакология 14.01.11 – нервные болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук М О С К В А - 2010 Работа выполнена на кафедре пропедевтики внутренних болезней и кафедре нервных болезней и нейрохирургии ГОУ ВПО ...»




 
© 2013 www.dis.konflib.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.